هعل ط ا م ر د و م عی ت مج

Transcript

1 ن ش ر ی ه م ی ک ر ب ی ل ژ ی د ا م پ ز ش ک ی / د ر ه چ ه ا ر د ه م ش م ا ر ه ا ل 1397 پ ی ا پ ی 1-12 : 36 خ ص ص ی ا ت پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ا ل ق ا ء ش د ه ن ا ش ی ا ز ا ک س ن ز ن د ه ت خ ف ی ف ح د ت ی ا ف ت ه آ ب ل ه ب ز ی س ی ه گ ر گ ا ن ب ر ع ل ی ه ب ی م ا ر ی ل م پ ی ا س ک ی ن گ ا د ح م ی *2 ر ض ا ن ر ی ا ن 1 ن ا ه ی د ه ا ف ض ل آ ه ن گ ر ا ن 4 ر ض ا ر ش ی 3 ع ب ا س آ ز ا د م ه ر 1- د ا ن ش ج ی د ک ت ر ی ت خ ص ص ی ا ی م ن ل ژ ی د ا ن ش ک د ه د ا م پ ز ش ک ی د ا ن ش گ ا ه ا ر م ی ه ا ر م ی ه ا ی ر ا ن 2- ا س ت ا د ی ا ر گ ر ه م ی ک ر ب ی ل ژ ی د ا ن ش ک د ه د ا م پ ز ش ک ی د ا ن ش گ ا ه ا ر م ی ه ا ر م ی ه ا ی ر ا ن 3- ا س ت ا د ی ا ر د پ ا ر ت م ا ن اکسنهای یرسی د ا م م س س ه ت ح ق ی ق ا ت ی ا ک س ن س ر م س ا ز ی ر ا ز ی س ا ز م ا ن ت ح ق ی ق ا ت آ م ز ش ت ر ی ج ک ش ا ر ز ی ک ر ج ا ی ر ا ن 4- د ا ن ش ی ا ر گ ر ه ا ی م ن ل ژی د ا ن ش گ ا ه ع ل م پ ز ش ک ی ب ا ب ل ب ا ب ل ا ی ر ا ن ت ا ر ی خ ی ا ف ت: 96/4/21 ت ا ر ی خ پ ذ ی ر ش : 96/8/10 چ ک ی د ه ی ر س ه ا ی ب ی م ا ر ی ل م پ ی ا س ک ی ن آ ب ل ه ب ز ی آ ب ل ه گ س ف ن د ی ا ز ا ع ض ا ء ج ن س ک ا پ ر ی ی پ ا ک س یرس از خاناده پاکس ی ر ی د ه ه س ت ند د دددد ددددددد. ا ی ن ی ر س ه ا ق ر ا ب ت ژ ن ت ی ک ی ب س ی ا ر ز ی ا د ی د ا ر ن د. ب ن ا ب ر ا ی ن ا س ت ف ا د ه ا ز ا ک س ن ه ا ی ح ا ی س ش ه ا ی ک ا پ ر ی پ ا ک س ی ر س م ش ت ق ش د ه ا ز ب ز گ س ف ن د برای کنترل ب ی م ا ر ی ل م پ ی ا س ک ی ن م ی ت ا ن د م ف ی د ب ا ش د. ه د ف ا ز ا ی ن م ط ا ل ع ه ا ر ز ی ا ب ی خ ص ص ی ا ت پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ا ل ق ا ء ش د ه ناشی از اکسن آ ب ل ه ب ز ی ب ر ع ل ی ه ب ی م ا ر ی ل م پ ی ا س ک ی ن گ ا میباشد. گسالهها ا ز ز م ا ن ت ز ر ی ق ا ک س ن ت ا 5 ه ف ت ه ب ع د ا ز آ ن ا ز ن ظ ر ظ ه ر ت ب ع م ب ا ل ی ن ی ب ط ر ر ز ا ن ه م ر د م ع ا ی ن ه قرار گرفتند. پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ه م ر ا ل ت س ط ت س ت خ ن ث ی س ا ز ی س ر م پ ا س خ خ ه ا ی ایمنی سللییییییی ت س ط ت س ت ت ت ت ته ا اای MTT PCR, Real-time ELISA م ر د ا ر ز ی ا ب ی ق ر ا ر گ ر ف ت. ن ت ا ی ج ن ش ا ن د ا د ک ه گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه ش د ه ه هه ت ب ب ت ر م م ض ع ی م ح ل ت ز ر ی ق م ق ا ی س ه با گره کنترل مشاهده شد. ا ر ز ی ا ب ی پ ا س خ ا ی م ن ی ه م ر ا ل ا ف ز ا ی ش م ع ن ی د ا ر ی م ی ز ا ن ت ی ت ر آ ن ت ی ب ا د ی اختصاصی در گ ر ه ا ک س ی ن ه م ق ا ی س ه با گره کنترل مشاهده شد ب ط ر ی ک ه ا ی ن م ی ز ا ن ر ز 35 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ا ی ن د ا ر ا ی ا ن ا ت م ف مییییییی د ا ر ی ن س ب ت ر ز ه ا ب د )))))0/05>P(. ارزیابی پاسخ ایمنی سللییییییییی ا ف ز ا ی ش م ع ن ی ی ی د ا ر ی بیان ژن ب ه س ا ی ر IFN-γ ر ز 7 ژ ن IL-4 ر ز 21 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن م ق ا ی س ه ب ا رز صفر گ ر ه ک ن ت ر ل م ش ا ه د ه ش د )0/05>P( ا ی ن ح ا ل ی ب د ک ه ب ی ش ت ر ی ن م ی ز ا ن ت ل ی د س ا ی ت ک ا ی ن م ا ی ع ر ی ی کشت سلل ب ر ا ی IFN-γ IL-4 ر ز 21 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن مشاهده شد )0/05>P(. همچنین شاخص ت ک ث ی ر ل ن ف س ی ت ی گ س ا ل ه هه ه ا ی ی ا ک س ی ن ه ر ز ه ا ی م ق ا ی س ه ب ا رز صفر گ ر ه ک ن ت ر ل ا ف ز ا ی ش م ع ن ی د ا ر ی ر ا ن ش ا ن د ا د. )0/05>P( ب ر ا س ا س ن ت ا ی ج این مطالعه ا ک س ن آ ب ل ه بزی سش گرگان ب ا ا ل ق ا ء پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ه م ر ا ل سللی ق ا ب ه ت ل ی د م ق ا د ی ر م ن ا س ب ی ا ز آ ن ت ی ب ا د ی ه ا ی خ ن ث ی ک ن ن د ه ه م چ ن ی ن ب ا ا ف ز ا ی ش ق ت ت ک ث ی ر ل ن ف س ی ت ی ب ی ا ن ت ل ی د س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ا ز ا ی م ن ی ز ا ی ی م ن ا س ب ی ج ه ت ا س ت ف ا د ه ا ک س ی ن ا س ی ن ب ر ا ب ر ب LSD ر خ ر د ا ر ا س ت. ک ل م ا ت ک ل ی د ی : ا ک س ن آ ب ل ه ب ز ی ا ی م ن ی س ل ل ی ا ی م ن ی ه م ر ا ل PCR MTT ELISA Real-time * ن ی س ن د ه م س ئ ل : ن ا ه ی د ه ا ف ض ل آ ه ن گ ر ا ن آ س : گ ر ه م ی ک ر ب ی ل ژ ی د ا ن ش ک د ه د ا م پ ز ش ک ی د ا ن ش گ ا ه ا ر م ی ه ا ر م ی ه ا ی ر ا ن. ت ل ف ن : پ س ت ا ل ک ت ر ن ی ک.n afzalahangaran@urmia. ac. ir

2 2 ن ش ر ی ه م ی ک ر ب ی ل ژ ی د ا م پ ز ش ک ی/ چ ه ا ر د ه م ش م ا ر ه ا ل 1397 پ ی ا پ ی 36 م ق د م ه ب ی م ا ر ی ل م پ ی ا س ک ی ن (LSD)) )Lumpy Skin Disease ن ع ی ع م م ی ب ی م ا ری ح ا د ت ا م ز من نن ن ن ن ننننن ب س ی ا ر ع ف ن ی ب ی م ا ر ی پ س ت ی گ ا ه ا م ی ی ی ب ا ش د د ک ه ا ز ن ق ط ه ن ظ ر س ا ز م ا ن ج ه ا ن ی ب ب ب ب ه د ا ش ت د ا م م م (OIE) ل ی س ت ب ی م ا ر ی ه ا ی اخطار کردنی ق ر ا ر د ا ر د. ی ر س ه ا ی ع ا م ل ب ی م ا ر ی ل م پ ی ا س ک ی ن آ ب ل ه گ س ف ن د ی آ ب ل ه ب ز ی ی م ت ع ل ق A ب ه ج ن س ک ا پ ر ی پ ا ک س ی ر س ا ز خ ا ن ا د ه پ ا ک س ی ر ی د ه میباشند) 16 (. ت م ا م ی س ی ه ه ا ی ک ا پ ر ی پ ا ک س ی ر س ب ا منشاء گای گسفندی ب ز ی ن ت ر ا ل ی ز ا س ی ن م ش ت ر ک ه س ت ن د د. ب ن ا ب ر ا ی ن ع ف ن ت ب ا یک سیه ب ه ب د م ی ی ا ب ن د یک سایییییییت ع م د ه ی ا دامهائییییی که ب ا ی ک س ی ه ا ز ا ک س ی ن ه م ی ش ن د ا ح ت م ا ال م ق ا ب ل ع ف ن ت س ا ی ر س ی هه ا اا ن س ب ت ت ت ا ا م ق ا م ن د )))16(. ب ر ه م ی ن ا س ا س س س س س ب س ی ا ر ی ا ز ک ش ر ه ا ا ز ا ک س ن ه ا ی ح ا ی س ی ه ه ا ی ک ا پ ر ی پ ا ک س ی ر س ب ا م ن ش اء گ س ف ن د ی ب ز ی ب ر ع ل ی ه ب ی م ا ر ی ا س ک ی ن ه م ه ه گ ی ر ی ی ه ا ا س ت ف ا د ه گ ر د ی د ه ا س ت ل م پ ی ( 20( 11(. ا ی ن ا ک س ن ه ا ع م د ت ا ا ز ن د ه ت خ ف ی ف ح د ت ی ا ف ت ه ب د ه ش ا مل ا ک س ن ی ر س ا ک س ن آ ب ل ه ب ز ی گ س ف ن د ی LSD س ی ه س ی ه Neethling ک ن ی ا یی ی ی یییییی ا ک س ن آ ب ل ا اا ه گ س ا اا ف ن د ی س ا اا ی ی ی ی ی ی ی ی ی ی ی ی ا ک س ن گسفندی سیه ر م ا ن ی م ی ی ی ب ا ش ن د د. ا ی ن ب ر ا ی ب ی م ا ر ی آ ب ل ه ا ل ی ن ب ا ر س ا ل 2014 ا ز م ر ز ه ا ی غ ر ب ی ش م ا ل غ ر ب ی ک ش ر ا ر د ا ی ر ا ن ش د ب ا ع ث خ س ا ر ا ت ج ب ر ا ن ن ا پ ذ ی ر ی به صنعت د ا م پ ر ر ی ک ش ر ا ک س ی ن ا س ی ن گ ر د ی د د د د د د د د د د. بدین ترتیب ا ا ا ض ط ر ا ر ی ج م ع ی ت د ا م ی ک ش ر ب ا ا ک س ن ه ا ی آ ب ل ه ب ز ی گ س ف ن د ی ج ه ت ک ن ت ر ل ب ی م ا ر ی LSD د س ت ر ک ا ر س ا ز م ا ن د ا م پ ز ش ک ی ک ش ر ق ر ا ر گ ر ف ت. ا ز آ ن ج ا ئ ی ک ه ا ک س ی ن ا س ی ن ب ع ن ا ن م ن ا س بت ر ر ی ن س ر ی ع ت ر ی ن ر ا ه ب ر ا ی ک ن ت ر ل پ ی ش گ ی ر ی ا ز ب ی م ا ر ی ن ظ ر گ ر ف ت ه ش د ه ا س ت ل ی ب س ی ا ر ی ا ز م ط ا ل ع ا ت ن ش ا ن د ا د ه ش د ه ا س ت ک ه ا س ت ف ا د ه ا ز ا ک س ن ه ا ی نامناسب که سطححح ا ی م ن ی محافظت کنندهههای ر ا ب د ن ن م ا ی ن د باعث شکست ا ک س ی ن ا س ی ن ز م ا ن ش ی ع ش د ه ه ا ن د د. ب د ی ن ب ی م ا ر ی ب ه ت ا ز ه ه ه گ ی ک ش ر ا ر د م ن ظ ر گ ا ا ی ج ا د ن م ی ی ی یییییی- گ س ت ر ش ب ی م ا ر ی از آنجائیکه ش د ه ا س ت ا ح ت م ا ل ا ی ن ش ی ع م ج د د آ ن ن ی ز م ی ر د ب ا ب ر ن ا م ه ر ی ز ی ب ا ب خ ش آ ب ل ه م س س ه ا ک س ن سرمسازی ر ا ز ی ا ر ز ی ا ب ی پ ا س خ خ خ خ خ ه ا ی ا ی م ن ی القاء شده ن ا ش ی ا ز ا ک س ن آ ب ل ه بزی سیه گرگان گ ا ب ص ر ت ت ج ر ب ی ب ه م ر ح ل ه ا ج ر ا آ م د. م ا د ر ش ک ا ر ج م ع ی ت م ر د م ط ا ل ع ه ا ز ی ک ا ح د گ ا د ا ر ی ش ی ر ی پ س تسطکلینیسینننننهای با تج ر ب ه اط م ی ن ا ن معاینات بالینی ا ز م ی ن اا ا ن گ س ا ل ه ه ا ت ع د ا د 15 ر أ س از گسالههای ن ژ ا د ه ل ش ت ا ی ن ن ر ب ا س ن ت ق ر ی ب ی 6-4 م ا ه ه ب ص ر ت ت ت ت ص ا د ف ی ا ن ت خ ا ب گ ر د ی د ن د. ک ل ی ه گ س ا ل ه هه ه ا ط ل مدت آزمایش ش ر ا ی ط ی ک س ا ن نگهداری شده ب ص ر ت ر ز ا ن ه ا ز ن ظ ر ع ا ر ض ج ا ن ب ی ا ک س ن م ر د ا ر ز ی ا ب ی ق ر ا ر گرفتند. ن ع ا ک س ن ا ی ن م ط ا ل ع ه ا ز ا ک س ن ز ن د ه تخفیف حدت ی ا ف ت ه آ ب ل ه ه ه ب ز ی سیه گرگان ساخت م س س ه ت ح ق ی ق ا ت ی ا ک س ن س ر م ر ا ز ی استفاده گردید. ا ی ن ا ک س ن ل ی ف ی ل ی ز ه ب د ه ه ه ه ر د ز آ ن ش ا م ل TCID 50/ml ی ر س س م ی ی ب ا ش د د. ط ب ق دسترالعمل شرکتتت سازندههه د ز 10 ب ر ا ب ر ا ک س ن ب ر ا ی ا ج ر ا ی ب ر ن ا م ه ا ک س ی ن ا س ی ن ب ر ن ا م ه ا ک س ی ن ا س ی ن گ ا تهیه گردید. ب ه 12 رأس گساله بعنان گره ت ی م ا ر ا ک س ن آ ب ل ه ب ز ی ب ه 3 ر أ س گ س ا له ب ع ن ا ن گر ه ک ن ت ر ل ل ل ل ل ل ل ل ل ل ل ل س ر م ف ی ز ی ل ژ ی تزریق گردید. ب ه هر گساله م ق د ا ر 5 م ی ل ی ل ی ت ر ا ز د ز 10 ب ر ا ب ر ا ک س ن از طریق ز ی ر ج ل د ی ن ا ح ی ه گ ر د ن تزریق گردیددد. کلیه گ س ا ل ه ه ههه ه ا ا ز ز م ا ن ت ز ر یی ی یییی ق

3 ق ب ل ا ز) خ ص ص ی ا ت پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ا ل ق ا ء ش د ه ن ا ش ی... 3 ا ک س ن ت ا 5 ه ف ت ه ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ن ب ص ر ت ا ز ن ظ ر ظ ه ر ت ب ب ب ب ب ب عارض جانبی ش ا م ل تر ش ح ا ت ر ز ا ن ه م خ ا ط ی ( چ ش م ی آ ب ر ی ز ش ا ز ب ی ن ی ) ) ت ر م غ د د ل ن ف ا ی م ض ع ی ت ر م م ض ع ی م ح ل ت ز ر ی ق م ر د م ع ا ی ن ه ق ر ا ر گ ر ف ت ه ک ل ی ه م ش ا ه د ا ت ث ب ت ض ب ط گ ر د ی د. آ م ا د ه س ا ز ی ی ر س ی ر س آ ب ل ه ب ز ی س ی ی ی یییی ه ب م ی گ ر گ ا ن ا ز ب خ ش آ ب ل ه م س س ه ا ک س ن سرمسازی ر ا ز ی ت ه ی ه ه ک ل ی ه م ر ا ح ل ک ش ت خ ا ل ص س ا ز ی غ ی ر ف ع ا ل س ا ز ی ت ی ت ر ی ر س ب ر ا س ا س د س ت ر ا ل ع م ل ه ا ی ا س ت ا ن د ا ر د م ج د ا ن ج ا م م م گ ر ف ت )21 18( 16. ت ی ت ر ی ر س ب ر م ب ن ا ی ی ییی یی ییییی log 10 TCID 50/ml ب ر ا س ا س ر ش Reed & munch م ح ا س ب ه گ ر د ی د )17(. ا ر ز ی ا ب ی پ ا س خ آ ن ت ی ب ا د ی ا خ ت ص ا ص ی ت س ت خ ن ث ی ی ی ی ی س ا ز ی سرمهمارهبعنان یکتست ا خ ت ص ا ص ی ا س ت ا ن د ا ر د جهت تعیین م ی ز ا ن آ ن ت ی ی یی ییییییی ب ا د ی ا خ ت ص ا ص ی ب ر ع ل ی ه ک ا پ ر ی پ ا ک س ی ر س س ه ا ثابت شده ا س ت )))11(. ا ی ن م ط ا ل ع ه ر ز ه ا ی ص ف ر ( ( ا ک س ی ن ا س ی ن ) ) ) ) ) ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن س ر م ه ا ی خ ن ک ل ی ه گ س ا له ه ه هههههه ه ا ج م ع آ ر ی م ی ز ا ن خنثیکنندگی سرم ب ر ا س ا س د س ت ر ا ل ع م ل ه ا ی ب خ ش آ ب ل ه م س س ه ر ا ز ی م ر د ا ر ز ی ا ب ی قرار گرفت )16 15(. ج د ا س ا ز ی س ل ل ه ا ی ت ک ه س ت های خ ن م ح ی ط ی ا ز ک ل ی ه گ س ا ل ه ه ا ی گ ر ه ت ی م ا ر ک ن ت ر ل ر ز ه ا ی ص ف ر ر ر بعداز اکسیناسیننننن ا ز م ح ل ر ی د د ا ج ی خ ن گ ی ر ی ب ع م ل آ م د. س ل ل ل له ا اای ( Peripheral Blood Mononuclear Cells) PBMCs ظظظرف م د ت ح د ا ک ث ر ج د ا 4 س ا ع ت پ س ا ز م ح ل ل ت س ط خ ن گ ی ر ی ف ا ی ک ل ب ر اساس شیب گرادیانت غ ل ظ ت ی ا ز خ ن ت ا م گ ر د ی د ن د د )14 6(. ت ع د ا د ص د ب د ن ز ن د ه س ل ل ه ا ب س ی ل ه ر ن گ آ م ی ز ی ب ا ر ن گ ت ر ی پ ا ن ب ل م ح ا س ب ه ( ص د ز ن د ه ب د ن ب ی ش ا ز م ب ن ا اای ) %95 ت ع د ا د س ل ل ل ل ه ا ب ر cell/ml ت ن ظ ی م گ ر د ی د د د د. ا ز ا ی ن س ل ل ل ل ل ه ا ب ر ا ی ت س ت ه ا ی ت ک ث ی ر ل ن ف س ی ت ی س ن ج ش س ا ی ت ک ا ی ن ن نه ا اا ب ه ر ش ا ال ی ز ا Real-time PCR استفاده گردید. ا س ت خ ر ا ج ج د ا س ا ز ی mrna س ا خ ت cdna ب م ن ظ ر ا س ت خ خ خ خ ر ا ج mrna ا ز س ل ل ل ل ه ا ی PBMCs ا ز ک ی ت ا خ ت ص ا ص ی Oligotex Direct mrna mini kit (Qiagen) ا س ت ف ا د ه گ ر د ی د د د د د د. ب د ی ن م ن ظ ر پ س ا ز جداسازی سللهای PBMCs از گسالههای ا ک س ی ن ه هه ب ر ا س ا س د س ت ر العمل شرکت سازنده کیت ا س ت خ ر ا ج ج ج ج ج mrna ه ا از سللها جدا گردیدنددد. م ر ح ل ه ب ع د ی ج ه ت س ا ا ا ا خ ت ر ش ت ه ا ل ی ه ن ک ل ئ ت ی د ی ت ص ا د ف ی ی ی ی ی cdna ا ز آ غ از گ ر ا ز کی ت ت ش Super Script III First-strand cdna synthesis kit (Fermentas, USA) ا س ت ف ا د ه گ ر د ی د د د د. ک ل ی ه م ر ا ح ل انجام آزمن برنامه سیکل حرارتی جهت د س ت ر ا ل ع م ل ک ی ت ش ر ک ت س ا ز ن د ه س ا خ ت cdna ب ر ا س ا س با استفاده ا ز ت ر م س ا ی ک ل ر ABI م د ل (Applied Biosystems, veriti USA) CA, ا ن ج ا م پ ذ ی ر ف ت. ا ر ز ی ا ب ی ب ی ا ن س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ب ه ر ش Real-time PCR ب ی ا ن س ط ح گ ی ر ی برای اندازه IL-4 IFN-γ ا ز ر ش Light Cycler ب ا ا س ت ف ا د ه ا ز د س ت گ ا ه Real-time PCR 96 (Roche Diagnostics, Mannheim, Germany) کی ت ت Diagnostics, SYBR Green I (Roche Germany) استفاده گردید. م خ ل ط ن ه ا ی ی ا ک ن ش ر ر ر ر ح ج م light cycler 8-tube strips clear 20µl ت ه ی ه گ ر د ی د. ط ر ا ح ی پ ر ا ی م ر ه ا ب ر ا س ا س ا م ع ا ت ژ ن ه ا ی IL-4 ت س ط ش ر ک ت IFN-γ گ ا ی ب ا ن ک ا م ع ا ت (Bioneer Corporation, ژ ن ی NCBI Bioneer Korea) Republic of س ا خ ت ه ش د. ت ا ل ی پ ر ا ی م ر ه ا م ر د ا س ت ف ا د ه در جدل- 1 گزارش شده است. ضمن ا ی ن ک ه ا ز GAPDH ب ه ع ن ا ن ژ ن ک ن ت ر ل داخلی استفاده گ ر د ی د د د د ددددد.

4 4 ن ش ر ی ه م ی ک ر ب ی ل ژ ی د ا م پ ز ش ک ی/ چ ه ا ر د ه م ش م ا ر ه ا ل 1397 پ ی ا پ ی 36 ب ر ن ا م ه س ی ک ل د م ا ی ی م ر د ا س ت ف ا د ه ش ا م ل م ر ا ح ل پ ی ش ش ش ش ش ش ش د م ا ی ی 95 C ب م د ت 10 د ق ی ق ه ب ه د ن ب ا ل آ ن Real-time PCR 50 C ب م د ت 5 د ق ی ق ه 40 س ی ک ل ترتیب شامل م ر ح ل ه دناتره شدن 95 C ب ه م د ت ثانیه م ر ح ل ه ا ت ص ا ل ل 56 C ب م د ت گ س ت ر ش 72 C ب م د ت 30 ث ا ن ی ه ب ی ا ن ژ ن ه ا ی م ر د ن ظ ر ب ا ر ش ک ه ب ه 20 ث ا ن ی ه م ر ح ل ه ب د 15 ( )22 5( م ی ز ا ن 2 - CT ا ر ز ی ا ب ی ت ک ث ی ر ل ن ف س ی ت ی ب ه ر ش MTT ت س ته ا ی ت ک ث ی ر ل ن ف س ی ت ی ه م ا ر ه ب ع ن ا ن ی ک ا ن د ا ز ه گ ی ر ی ش د. ت س ت ک ل ی د ی ب ر ا ی ا ر ز ی ا ب ی م ی ز ا ن تان سللی پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی م ر د ا س ت ف ا د ه قرار میییییییگیرددد. ا ی ن م ط ا ل ع ه ا ز ت س ت MTT (Cell Proliferation Kit, Roche, Germany) ج ه ت ا ن د ا ز ه گ ی ر ی م ی ز ا ن تکثیر لنفسیتی ا س ت ف ا د ه گ ر د ی د د د. ب ط ا ا ر ه ه ه ه ه ه م ق د ا ر PBMCs شمارش شده ب ا غ ل ظ ت 100 م ی ک ر ل ی ت ر ا ز cell/well ب ه درن گدههای م ی ک ر پ ل ی ت ک ش ت س ل ل ر ی خ ت ه س پ س 100 م ق د ا ر میکرلیتراز یرسغیر غ ع ا ل ا ح ت س ا ب MOI=0/1 ب ر ا س ا س ا پ ت ی م م ش د ه ب ا ظ ر ف ی ت ت ح ر ی ک ی ر س ( د ا د ه ه ا ن ش ا ن د ا د ه ن ش د ه ا س ت ) ب ر ری سللها اضافه گردید. سللهای ت ح ر ی ک ش د ه د م ا ی 37 C ا ت م س ف ر ح ا ی %5Co2 ب م د ت 96 س ا ع ت ا ن ک ب ه ش د ن د )18 14(. ب ع د ا ز ز م ا ن انکباسیننن جهت ج د ا س ا ز ی م ا ی ع ر ی ی از سللها م ی ک ر پ ل ی ت ه ا س ا ن ت ر ی ف ی ژ گ ر د ی د ه م ا ی ع ر ی ی ک ش ت س ل ل ج ه ت بررسی میزان غ ل ظ ت س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ب ر د ا ش ت ه ت ا ز م ا ن ا ن ج ا م آ ز م ا ی ش د م ا ی 80 C- ف ر ی زر ن گ ه د ا ر ی ش د د د د د د. ب ر ر ی س ل ل ل ل ل ه ا ی م ج د ک ف پ ل ی ت ب ر اساس دسترالعمل ش ر ک ت س ا ز ن د ه ک ی ت ت ت ت س ت ت ک ث ی ر ل ن ف س ی ت ی ا ن ج ا م م ی ز ا ن ر ن گ ن م ن ه ه ا ب ا د س ت گ ا ه ا ل یا ز ا پ ذ ی ر ف ت ت ت تتتتتتتت. ر ی ر ( Bio-Tek ELx808) ب ا ط ل م ج 550 ن ا ن م ت ر ر ف ر ا ن س 690 ن ا ن م ت ر قرائت گردید. جذب ط ل م ج ن م ن ه ه ه ه ا ب ر اساس فرملشاخص گ ر د ی د )6(. ت ح ر ی ک ک ک ک ک ک ک ک ک ک م ح ا س به گ ز ا رش ا ر ز ی ا ب ی غ ل ظ ت س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ب ه ر ش ELISA ا م ر ز ه ع م ل ک ر د ب س ی ا ر ی ا ز پژهششششششششهااز تجزیه ت ح ل ی ل لنفسیتتتتتهای تلید ش د ه ن ا ش ی ا ز ت ح ر ی ک مجدد سللهای PBMCs ب ا س ی ه ک ش ت ه ش د ه ی ر س ب ر ر س ی ن ع میزان سایتکاینهای تلید شده ب ه ع ن ا ن ا ل گ ی ی ب ر ا ی ت ش ر ی ح مکانیسم اصلی ت ح ر ی ک س ی س ت م ا ی م ن ی ت س ط ا ک س ن ا س ت ف ا د ه م ی ش د د. ب د ی ن ا ی ن م ط ا ل ع ه پ س ا ز ت ح ر ی ک مجدد سللهای به بررسی م ن ظ ر PBMCs س ا ی ت ک ا ی ن ن ن ن ن ن ن نه اای IL-4 IFN-γکه نقش ک ل ی د ی پ ا س خ ه ا ی ایمنی همرال س ل ل ی ب ع ه د ه د ا ر ن د پ ر د ا خ ت ه ش د. م ا ی ع ر ی ی ک ش ت س ل ل ی ز م ا ن ه ا ی م ت ا ل ی ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ج م ع آ ر ی ب ر ا ی ت ع ی ی ن م ی ز ا ن غ ل ظ ت س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ا ز ک ی ته ا اا ی ا ال ی ز ا ی IL-4 USA) IFN-γ (USCN Life Science Inc. ب ر م ب ن ا ی ت ک ن ی ک االیزای ساندیچ استفاده گردید. ا ی ن ر ش ک ل ی ه م ر ا ح ل آ م ا د ه ه س ا ز ی ی ن م ن ه ه ت ه ی ه م ح ل ل ل ل له ا اا ت ه ی ه غ ل ظ ت ه ا ی مختلف کنترلهای م ث ب ت ا ن ج ا م آ ز م ن ب ر ا س ا س د س ت ر ا ل ع م ل ش ر ک ت س ا ز ن د ه ک ی ت ا ن ج ا م پ ا ی ا ن ج ذ ب ن م ن ه ه ا ب ا ا س ت ف ا د ه ا ز د س ت گ ا ه ا ل یا ز ا ر ی ط ل م ج 450 ن ا ن م ت ر ق ر ا ئ ت گ ر د ی د د. ج ه ت د ا د ه ه ا ر س م منحنی کالیبراسین ا ز ت ح ل ی ل ن ر م ا ف ز ا ر Ridawin Germany) (r-biopharm, ا س ت ف ا د ه گ ر د ی د د د د. ک م ت ر ی ن ح د ت ش خ ی ص ب ر ا ی IL-4 6/2 pg/ml ب د. ت ح ل ی ل آ م ا ر ی د ا د ه ه ا ن م د ا ر ه ا ب ر ا س ا س م ی ا ن گ ی ن ن م ا ی ش د ا د ه ش د ه ا س ت ت ت. ب ر ا ی آ ز م ن ن نه ا ای آ م ا ر ی ا ر ی ا ن س ک ی ت ت ت 12/8 pg/ml IFN-γ ب ر ا ی ± ا ن ح ر ا ف م ع ی ا ر م ق ا ی س ه ب ی ن گ ر ه ه ه هههههه ه ا ا ز ا س ت ف ا د ه ا خ ت م ف ب ی ش ا ز %95 د ا م ن ه ا ط م ی ن ا ن one-way ANOVA ب ا م ق د ا ر

5 ن م د ا ر- 3 (.) ن م د ا ر- 2 (.) خ ص ص ی ا ت پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ا ل ق ا ء ش د ه ن ا ش ی /05>P ا ز ن ظ ر آ م ا ر ی م ع ن ی د ا ر نظر گرفته شد. ب ر ا ی آ ن ا ل ی ز د ا د ه ه ا ا ز ن ر م ا ف ز ا ر ر ررررر SPSS ی ر ا س ت ش د. ن ت ا ی ج ب ر ر س ی ع ا ر ض ج ا ن ب ی ا ک س ن د م ا ی ب د ن ک ل ی ه گ س ا ل ه ه ا ط ل م د ت ت ر م م ت ر ا ز ن ا ح ی ه ر ک ت م ب ص ر ت م مم ط ا ل ع ه 18 ا س ت ف ا د ه ت س ط ر ز ا ن ه م ر د ا ر ز ی ا ب ی قرار گرفت د م ا ی ب ا ال ت ر ا ز 40 C ب ع ن ا ن د م ا ی ت ب نظر گرفته ش د د د. ب ا ت ج ه ب ه ن ت ا ی ج نشان داده ش د ه ن م د ا ر -1 ا ف ز ا ی ش د م ا ی ب د ن گ س ا ل ه ه ههه ه ا ا ز ا ل بعد از اکسیناسین آ غ ا ز ر ز م د ت 24 س ا ع ت ب ا ال ت ر ی ن م ی ز ا ن خ س ی د ر ز ه ا ی ب ع د ب ت ی ج 3 ب ه ک ا ه ش ی ا ف ت ب ط ر ی ک ه ا ز ر ز ه ف ت م ب ه ب ع د ب ه ح د ط ب ی ع ی خ د )39/5-38/5 ) ر س ی د ه ب د. ق ط ر ت ر م م ض ع ی محلتلقیح در پ ا س خ به آنتیژنننننننننننننهای اکسننننن گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه ش د ه م ق ا ی س ه ب ا گ ر ه ک ن ت ر ل د ا ر ا ی ا ف ز ا ی ش م ع ن ی د ا ر ی ب د. ب ر ر س ی ت ی ت ر س ر م ی آ ن ت ی ب ا د ی ا خ ت ص ا ص ی ت ل ی د ش د ه ن ا ش ی ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ب د ل ی ل تیتر سرمی آ ن ت ی ب ا د ی ب ت ی ج ب ط ر ی ک ه ا ل ی ن ت ی ت ر آ ن ت ی ی ب ا د ی ت ل ق ی ح ی ر س ش ر ع ب ه ب د ن د ا م مم م م مممممم ب ه ا ف ز ا ی ش ر ز ر ز 35 ب ه ا پ ت ی م م مقدار خ س ی د. ن ت ا ی ج تیتر سرمی ا ک س ی ن ا س ی ن ب ت یج )P<0/05( آ ن ت ی ی ی ی ی ب ا د ی دارای افزایش ب ا م ق ا ی س ه 7 ش ن ا س ا ی ی ن م د د د د ددددددد. ن ش ا ن د د د ا د ک ه ر ز ز زه ا اا ی ب ع د ا ز ک ن ت ر ل گ ر ه ر ز ص ف ر م ع ن ی ی یی ی د ا ر ی ب د ه س ن ج ش ب ی ا ن س ا ی ت ک ا ی ن ن ه ا ی ی ش ر ا ی ط in vivo ا س ت IL-4,IFN-γ پ س ا ز اکسیناسین گسالهها ب م ن ظ ر ا ر زیی ی یییی ا ب ی ب ی ا ن ژ ن ه ا ی س ا ی ت کا ی ن ی ش ر ا ی ط گ س ا ل ه ه ا ز م ا ن ه ا ی م ر د م ط ا ل ع ه ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن خ ن گ ی ر ی ب ع م ل آمد. سللهای ج د ا ب ی ا ن ژ ن ن ن ه ا ی IL-4, IFN-γ ت س ط PBMCs ا ز خ ن ت ا م Real-time PCR م ر د ا ر ز ی ا ب ی قرار گرفت. ب ا ج د ی ک ه م ی ز ا ن ب ی ا ن س ا ی ت ک ا ی نه ا خ ن ت ا م ن س ب ت ا ا پ ا ی ی ن ب د ل ی ا ی ن م ی ز ا ن ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ن س ب ت به گره ک ن ت ر ل ر ز ص ف ر د ا ر ا ی ا ف ز ا ی ش ب د. ب ی ا ن ت ل ق یح ش ر ع ر ز IFN-γ ا ز س ا ع ا ت 7 ب ا ال ت ر ی ن م ی ز ا ن ب د ه پ س ا ز ا ل ی ه ب ع د ا ز بعد از اکسیناسین د ا ر ا ی آ ن ت ا پ ا ی ا ن م ط ا ل ع ه ک ا ه ش ی ا ف ت ه ا س ت ا ی ن ا خ ت م ف ا ف ز ا ی ش ش ب ی ن رزهای صفر ب ت ی ج 7 ر ز ا ز ن ظ ر آ م ا ر ی ن ی ز م ع ن ی ی ی ی ی ی ی ی د ا ر م ی ب ا ش د )0/05>P(. م ق ا ب ل خ ص ص IL-4 م ی ز ا ن ب ی ا ن ژ ن ا ز ر ز افزایش تدریجی 7 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن د ا ر ا ی ی ک ب د ه ر ز ب ه ب ا ل ات ر نی م ی ز ا ن ب ی ا ن خ س ی د ه ا س ت ا ی ن ا ن ا ت م ف ب ا ی ن ر رزهای صفر 21 )P<0/05( 7 ا ز ن ظ ر آ م ا ر ی م ع نیی ییییی د ا ر م ی ی ب ا ش د ا ر ز ی ا ب ی ا ی م ن ی ب ا ا س ط ه س ل ل ی ش ر ا ی ط in vitro س ن ج ش ت ک ث ی ر ل ن ف س ی ت ی ب ر ر س ی پ ا س خ ه ا ی ایمنی که ل ن ف س ی ت ت ت ه ا ب ا ی ر س صرت میییییپذیرددد ب ر ا ی م ت ع ا ق ب ت ح ر ی ک ش ر ا ی ط آ ز م ا ی ش گ ا ه ی پ ی ب ر د ن ب ه م ج د د م ی زا ن ت ک ثی ر ا خ ت ص ا ص ی ل ن ف س ی ت ه ا ش ر ا ی ط in vivo پ ا س خ ب ه آ ن ت ی ژ ن ن ن نه ا اا ا ی ا ک س ن ن ن ض ر ر ی ا س ت ( ( ( )10 2( ه م چ ن ی ن ا ز این طریق م ی ت ا ن ب ه ف ن ت ی پ تکثیر سللی ن ع پ ا س خ ا ی م ن ی ب د ن م ا ج ه ه ب ا ی ر س ن ی ز پ ی )18 9(. ا ی ن مط ا ل ع ه ه ه ه ه ه هه ه س ل ل ل ل ل ه ا ی گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه ش د ه ا ز خ ن ت ا م ج د ا آ ز م ا ی ش گ ا ه ی م ج د دا ا ب ا ی ر س ک ش ت ه ش د ه آ ب ل ه ب ز ی ب ر د PBMCs ش ر ا ی ط م ج ا ر ت داده شد. ن ت ا ی ج ن ش ا ن د ا د ک ه ش ا خ ص ت ح ر ی ک in vivo ا ز ک ل ی ه (SI)) (Stimulation Index ل ن ف س ی ت ت ه ا پاسخ به

6 ن م د ا ر ر ر- 4 (.) 6 ن ش ر ی ه م ی ک ر ب ی ل ژ ی د ا م پ ز ش ک ی/ چ ه ا ر د ه م ش م ا ر ه ا ل 1397 پ ی ا پ ی 36 ی ر س ه ر ی ک از گسالهها ه ف ت ه ه ا ی م ت ا ل ی ب س ی ا ر م ت غ ی ر م ی ب ا ش د ا ی ن حالی بد ک ه PBMCs گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه م ق ا ی س ه ب ا گ ر ه ک ن ت ر ل د ا ر ا ی ش ا خ ص ت ک ث ی ر ب ا ال ت ر ی ب د ن د. SI گسالههای ا ک س ی ن ه ا ز ر ز 7 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ش ر ع ب ه ا ف ز ا ی ش ن م د ه ر ز 21 ب ه ا پ ت ی م م م ق د ا ر خ س ی د ه ا س ت پ س ا ز آ ن ب ت ی ج ک ا ه ش ی ا ف ت ه ا س ت. ب ط ر ی ک ه ا ی ن میزان افزایش ر ز ه ا ی ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن م ق ا ی س ه ب ا رز صفر گ ر ه ک ن ت ر ل د ا ر ا ی ا خ ت م ف م ع ن ی د ا ر ی ن ی ز م ی ی ی ب ا ش د ( ( )0/05>P ) ن ت ا ی ج ب ی ن ر ز ه ا ی م ت ا ل ی م ش خ ص ر ز 21 م ع ن ی ی د ا ر ی م ی ی ب ا ش د ن س ب ت ب ه ر ز ص ف ر ه م چ ن ی ن م ی ا ن گ ی ن ش د ک ه م ق ا ی س ه SI 35 د ا ر ا ی ا ف ز ا ی ش )0/05>P ) ل ی ن س ب ت ب ه باجدیکه دارای افزایش ب د ل ی ا ز ن ظ ر م ع ن ی د ا ر ن ب د. آ م ا ر ی 7 ر ز س ن ج ش غلظت سایتکاینهای IL-4 IFN-γ م ا ی ع ر ی ی ک ش ت س ل ل ه ا ی PBMCs مایعریی کشت سللهای PBMCs ت ح ر ی ک ب ا ش د ه ی ر س ک ش ت ه ش د ه آ ب ل ه ب زی ی ی یییی ب م ن ظ ر ج د م ی زز ز زززز ا ن غلظت سایتکاینهای IL-4 IFN-γبسیله کیتتتهای ا ال ی ز ا م ر د س ن ج ش قرار گرفت. م ی ز ا ن ا ی ن س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ه ر ی ک از گسالهههها ر ز ز زه ا اا ی م ت ا ل ی م ق ا د ی ر م ت ف ا ت ی ر ا ا ز خ د ن ش ا ن د ا د ا ی ن م ی ز ا ن گ ر ه ت ی م ا ر م ق ا ی س ه ب ا ر ز ص ف ر گ ر ه ک ن ت ر ل دارای افزایش م ع ن ید ا ر ی ب د. م ی ا ن گ ی ن غلظت سایتکاینننهااای IL-4 IFN-γ د ا ر ا ی د ا م ن ه ب س ی ا ر م ت ف ا ت ی س ط ح ت ل ی د م ی ی ی ب ا ش د د ب ط ر ی ک ه IFN-γ IL-4 ا ز ر ز 7 ب ع د ا ز اکسیناسین شرع ب ه ا ف ز ا ی ش ن م د ه پ س ا ز ر س ی د ن ب ه ح د ا ک ث ر م ی ز ا ن خ د ر ز ا ی ن 21 ر زه ا اا ی ب ع د ی ب ا ش ی ب م م ی م ک ا ه ش پ ی د ا ک ر د ه ا س ت. خ ص ص IFN-γ ص ف ر افزایش دارای یک ا ک ا ن ا ت م ی ی ی یی یییییی د ا ر ی ب ین ر ز ر ز ه ا ی م ی ب ا ش د دد) P<0/05 (. ح ا ل ی ک ه خ ص ص ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن IL-4 ا ی ن ا خ ت م ف ف ق ط ب ی ن رز صفر ر ز 21 م ع ن ی د ا ر م ی ی ب ا ش د )0/001>P( ب ر ا ی س ا ی ر ر ز ه ا )7 ) 35 ب ا ج د ی ک ه ن س ب ت ب ه رز صفر د ا ر ا ی س ط ح ب ا ل تا ر ی م ی ی ب ا ش ن د د ل ی ا ی ن ا ف ز ا ی ش ا ز ن ظ ر آ م ا ر ی م ع ن ی د ا ر ن ب د ( ن م د ا ر- 6 (. ن م د ا ر ش م ا ر ه- 1 : د م ا ی ب د ن ( ا ز ن ا ح ی ه ر ک ت م ) گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه ش د ه ب ا ی ر س ز ن د ه ت خ ف ی ف ح د ت ی ا ف ت ه آ ب ل ه ب ز ی س ی ه گ ر گ ا ن ر ز ه ا ی ب ع د شماره در بانک ژن ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ج د ل ش م ا ر ه- 1 : ت ا ل ی پ ر ا ی م ر ه ا ی IL-4 ( IFN-γ گ ا ی ژ ن ک ن ت ر ل س ک ا ن س پرایمر ژ ن IL-4 AGC TGA TCC CAG TGC TGG TC-3' Forward: 5'-ACC Reverse: 5'-TGC TAC AGG CAG CTC CAT GCA-3' M77120

7 خ ص ص ی ا ت پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ا ل ق ا ء ش د ه ن ا ش ی... 7 IFN-γ GAPDH Forward:5'-CTC CGG CCT AAC TCT CTC CT-3' Reverse: 5'-AGG CCC ACC CTT AGC TAC AT-3' Forward:5'-GGC GTG AAC CAC GAG AAG TAT AA-3' Reverse: 5'-CCC TCC ACG ATG CCA AAG T-3' M29867 U22385 ن م د ا ر ش م ا ر ه- 2 : ت ی ت ر آ ن ت ی ب ا د ی گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه ش د ه ب ا ی ر س ز ن د ه ت خ ف ی ف ح د ت ی ا ف ت ه آ ب ل ه ب ز ی س ی ه گ ر گ ا ن ر ز ه ا ی ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ن م د ا ر ش م ا ر ه- 3 : م ی ز ا ن ب ی ا ن mrna س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ی ( IFN-γ IL-4 س ل ل ه ا ی PBMCs گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه ش د ه ب ا ی ر س ز ن د ه ت خ ف ی ف ح د ت ی ا ف ت ه آ ب ل ه ب ز ی س ی ه گ ر گ ا ن ر ز ه ا ی ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ش ر ا ی ط in vivo ن م د ا ر ش م ا ر ه- 4 : ش ا خ ص ت ح ر ی ک س ل ل ه ا ی PBMCs گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه ش د ه پ ا س خ ب ه ی ر س ک ش ت ه ش د ه آ ب ل ه ب ز ی س ی ه گ ر گ ا ن ر ز ه ا ی ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن

8 8 ن ش ر ی ه م ی ک ر ب ی ل ژ ی د ا م پ ز ش ک ی/ چ ه ا ر د ه م ش م ا ر ه ا ل 1397 پ ی ا پ ی 36 ب ح ث ن م د ا ر ش م ا ر ه- 5 : م ی ز ا ن ت ل ی د س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ی ( IFN-γ IL-4 در م ا ی ع ر ی ی ک ش ت س ل ل ه ا ی PBMCs گ س ا ل ه ه ا ی ا ک س ی ن ه ش د ه پ ا س خ ب ه ا م ر ز ه ا ک س ی ن ا س ی ن ب ع ن ا ن ک ا ر ب ر د ی ت ر ی ن ا ب ز ا ر برای کنترل پ ی ش گ ی ر ی د ا م ی ب ی ژ ه ب ی م ا ر ی ل م پ ی ا س ک ی ن ا س ت ت. امااز آنجائیکه در ا ز ی ر س ک ش ت ه ش د ه آ ب ل ه ب ز ی س ی ه گ ر گ ا ن ر ز ه ا ی ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ش ر ا ی ط in vitro ب ی م ا ر ی ی ی ی ی ه ا ی ا ر ت ب ا ط ب ا د ی ن ا می ک س ی س ت م ا ی م ن ی ی ن ح ه پ ا س خ سا ی ت کا ی ی ی ی ی ی ی ن ی چ گ ن گ ی م ث ر ت ر ی ن ی ر س ی ن ظ ر گ ر ف ت ه ش د ه ا ی ن گ ن ه ا ک س ن ه ا ا ی ج ا د ی ک ا ی م ن ی م ح ا ف ظ ت ع م ل ک ر د ک ن ن د ه م ق ا ب ل LSD ا م ع ا ت ک ا م ل ی د س ت ر س ن ی س ت ت ل ذ ا ه د ف ا ز ا ی ن م ط ا ل ع ه ب ر ر س ی پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ا ل ق ا ء ش د ه ن ا ش ی ا ز ا ک س ن آ ب ل ه ب ز ی ک ه ط ی ف س ی ع ی از جمعیت دامی کشر ب س ی ل ه آ ن م ق ا ب ل LSD اکسینه شدهاند پ ر د ا خ ت ه ش د. ب د ی ن م ظ ر ا ی م ن ژ ن ی س ی ت ه هه ع ا ر ض ج ا ن ب ی ی ی ی ی ت ی ت ر آ ن ت ی ب ا د ی ا خ ت ص ا ص ی ت ک ث ی ر ل ن ف س ی ت ی م ی ز ا ن ب ی ا ن ت ل ی د س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ی IFN-γ IL-4 پ ا س خ ب ه آ ن ت ی ژ ن ه ا ی ا ک س ن م ر د ب ر ر س ی قرار گرفت. گ س ا ل ه ه ه ه ای ا ک س ی ن ه ش د ه اک ن ش ش ش ش ش ش ش ش ش ه ا ی م ض ع ی خ ف ی ف ی ب ه ش ک ل ق ر م ز ی ترم خفیف م ح ل ت ز ر ی ق ت ع د ا د ی ا ز آ ن ه ا ع م ی م ب ا ل ی ن ی ن ظ ی ر آبریزش از بینی مشاهده شد )15 7( 3. ا ک ث ر ی ت گ س ا ل ه ه ههه ه ا ت ر م م ض ع ی ن ا ش ی ا ز پ ا س خ ا ی م ن ی س ل ل ی ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ن ی ز م ش ا ه د ه ش د ک ه خ د د ل ی ل ب ر ب ا ر ا ی م ن ژ ن ی س ا ی ت ه ب ا اال ی ی ر س م ی ب ا ش د. م ا ر د ی م ح ل ت ز ر ی ق ا ک س ن م ش ا ه د ه ن ش د ک ه ا ک ن ش مم م مممم ض ع ی د ل ا تل ب ر ت ض ع ی ف ب ی ش ا ز ح د ی ر س ط ی م ر ا ح ل آ م ا د ه س ا ز ی ا ک س ن م ی ب ا ش د بنابراین چنین ی ر س ی ن ه ت ن ه ا ق ا ب ه ت ح ر ی ک پ ا س خ ا ی م ن ی ن ه ا ی ت م ن ج ر ب ه )11(. ب ا ج د ی ک ه س ل ل ی ه م ر ا ل نخاهد بد ب ل ک ه ش ک س ت ا ک س ی ن ا س ی ن ن ی ز خ ا ه د ت ل ی د آ ن ت ی ی ی ی ی ب اد ی ب ع ن ا ن ی ک ی ا ز م ه م ت ر ی ن ف ا ک ت ر ه ا پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی م ح ا ف ظ ت ب ر ا ب ر ب ی م ا ر ی ه ا ی م ط ر ح م ی ب ا ش د د م ق ا ب ل ناشی از کاپریییییییپاکس پ ا س خ خ خ خ خ ه ا ی ت ل ی د س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ن ی ز ا ی م ن ی م ح ا ف ظ ت ب س ز ا ی ی د ا ر ن د ( ( ( )19 12(. ب د ی ن م ن ظ ر آنتیییبادیییهای اختصاصی ژنهای اکسن ک م ک ت س ت به ش د ک ن ن د ه ی ر س س س س س ه ا ایمنی سللی ک ن ن د ه القاء شده ن ا ش ی ا ز آ ن ت ی ن ق ش م ی ز ا ا ا ا ا ا ن ت ل ی د خن ث ی ی ی ی ی ی ی ی ی ی ی ی ی ی س ا ز ی ی ی س ر م ا ن د ا ز ه ه ه گ ی ر ی ش د د د د. نتایج نشانداد ک ه س ی ست م ا ی م نی گسالههای گره ت ی م ا ر ب ه ا ک س ن پ ا س خ د ا د ه ا ی ن م ی ز ا ن ا ز ر ز 7 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن آ غ ا ز ش د ه ت ا ر ز 35 ن ی ز ا د ا م ه د ا ش ت ه ا س ت. ا ی ن ی ا ف ت ه ه ا ب ا ن ت ا ی ج ب د س ت آ م د ه ا ز س ای ر م ط ا ل ع ا ت ک ه آ ن ن ن ن ن ن ن ه ا ع ن ا ن ش د ه ا ست گ ا ه ا ی ا ک س ی ن ه ب ا ا ک س ن ه ا ی ک ا پ ر ی ی پ ا ک س ت ل ی د آ ن ت ی ب ا د ی ا ز ر ز ه ا ی ی ر س ا ل ی ه ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن

9 خ ص ص ی ا ت پ ا س خ ه ا ی ا ی م ن ی ا ل ق ا ء ش د ه ن ا ش ی... 9 آ غ ا ز خ ا ه د ش د م ط ا ب ق ت د ا ر د )13 1(. ا ی ن ن ت ا ی ج د ال ل ت ب ر ا ی م ن ی ز ا ی ی ا ک س ن ک ا ر ا ی ی ا س ت ف ا د ه ا ز آ ن ب ر ا ب ر ب ی م ا ر ی میباشد. جهت ا ر ز ی ا ب ی پ ا س خ خ خ خ خ ه ا ی ا ب س ت ه س ل ل ا ب ت د ا ء میزان تکثیر ل ن ف س ی ت ی ک ه م ر ب ط ب ه نقش سللهای T-helper پ ا س خ ژ ن ه ا ی ا ک س ن م ی ب ا ش د م ر د ب ر ر س ی ق ر ا ر گ ر ف ت م ی ز ا ن ت ک ث ی ر س ل ل ه ا ی PBMCs گسالههههای ش د ه ک ه ش ر ا ی ط in vivo ب ا س ش ا ی م ن ی ع م د ت ع م ا دتا ا ب ه آ ن ت ی اکسن تحریک. )4( ا ک س س س س س ی ن ه ش د ه ب د ن د ش ر ا ی ط in vitro م ج د د د ا ا ب ا ه م ا ن س ش ا ک س ن تحریک گردیدند ت ا ب ا ب ر ر س ی م ی ز ا ن ت ک ث ی ر نع سایتکاینهای ت ل ی د ی ب ت ا ن تا حددی ب ه ن ح ه پاسخ سللی ب د ن مقابل یرس پیییییییییبرددد. شاخص ت ح ر ی ک ل ن ف س ی ت ی گسالههههههههای اکسینهشدههههههه ا ز ر ز ه ا ی ا ل ی ه ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن آ غ ا ز ه ف ت ه ب ه ح د ا ک ث ر م ی ز ا ن خ س ی د ک ه ن ش ا ن ا ز ا ج ت ح ر ی ک س م س ل ل ی شکلگیری ن ع پ ا س خ ا ی م ن ی هفته سم ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن خ ا ه د د ا ش ت ( ( )13 8(. ا ز آ ن ج ا ئ ی ک ه س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ع م م ا ا ب ص ر ت م ض ع ی م ق ا د ی ر ب س ی ا ر ج ز ئ ی ت ل ی د م ی ش ن د ب ن ا ب ر ا ی ن غ ل ظ ت آ ن ه ا ب ص ر ت سیستمیک در شناسایی میزان ت ر ش ح بدن بسیار م ش ک ل م ی ب ا ش د ا ز ا ی ن ر ا ب ت د ا ء م ی ز ا ن ب ی ا ن ژنننننهااای سایتکاینی ن ا ش ی ا ز ت ح ر ی ک ل ن ف س ی ت ه ا ب ص ر ت س ی س ت م ی ک ( ( ( ( ( in ) vivo م ر د ب ر ر س ی قرار گرفت س پ س آ ز م ا ی ش گ ا ه ی ل ن ف س یت ه ا ب ا ه م ا ن س ش ت ح ر ی ک ب ا ( ( in ا ک س ن )vitro ا ی ن ب ا ر م ی ز ا ن ت ل ی د س ا ی ت ک ا ی ن ن ن ه ا م ر د س ن ج ش قرار گرفت ت ا ب ا ت ح ل ی ل ا ی ن ن ت ا ی ج ب ت ا ن ب ه ن م ا ی ی ک ل ی م ی ز ا ن ب ی ا ن ژنهای سایتکاینی ا ز ه م چ ن ی ن م ی ز ا ن ت ل ی د ا ز آ ن ه ا پ ا س خ ب ه ا ک س ن د س ت ی ا ف ت. چ ر ا ک ه ب س ی ا ر ی مطالعات ثابت شد ه ا ست س ا ی ت ک ا ی ن ی ه م ی ش ه ب ا ک ه ه ه هه ه ه ه هه ه میزان بیانژنننننهای م ی ز ا ن ت ل ی د ت ر ش ح م س ت ق ی م ن د ا ش ت ه ر ن ش ت ژ ن م م ک ن ا س ت آ ن ن ه ا ا ر ت ب ا ط ت أ ث ثث ی ر ت ح ت ل ذا ع ا م ل م خ ت ل ف درن سللی ب ه م ر ح ل ه تلید نرسیده سرکب شد. ل ذ ا ب ر ر س ی ا ر ت ب ا ط ب ی ن م ی ز ا ن ب ی ا ن م ی ز ا ن ت ل ی د س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ا ز ن ظ ر ع ل م ی ب س ی ا ر ب ا ا ه م ی ت م ی ب ا ش د. ا ی ن تح ق ی ق س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ی د ا د ب ی ا ن بعد از اکسیناسین م ی ز ا ن ب ی ا ن IFN-γ IL-4 ا ر ز ی ا ب ی ش د. ن ت ا ی ج ن ش ا ن IFN-γ ر ز 7 بعداز اکسیناسیندارای ب ا ال ت ر ی ن م ی ز ا ن ب د ه پ س ا ز کاهش یافته ا س ت ن ش ا ن ک ه خ د آ ن ت ا پ ا ی ا ن م ط ا ل ع ه دهنده شرع ب ت ی ج تحریکات سللی ر ز ه ا ی ا ل ی ه ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ب ی ا ن س ا ی ت ک ا ی ن ه ا ی ا ل ت ه ا ب ی ب ی ژ ه IFN-γ م ی ب ا ش د. ا ی ن ن ت ا ی ج ب ا ن ت ا ی ج م ش ا ه د ه ش د ه ر ز ه ا ی ا ل ی ه ب ع د ی ر س ش ر ع ع م ی م ب ا ل ی ن ی ن ظ ی ر ت ب ا ل ت ه ا ب ن ا ح ی ه ت ز ر ی ق IL-4 میزان بیان ژ ن ا ز ت ل ق ی ح ت ر م مطابقت دارددددد. م ق ا ب ل ل خ ص ص ر ز 7 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن بسیار کم ب د ه ل ی ر ز ب ه بالارتین میزان ب ی ا ن خ د آ ن ت ی ب ا د ی ب د ه ت ل ی د ر س ی د ه ک ه ر ز ا س تت ت تتتت. ا ی ن ن ی ز ار ت ب ا ط م عن ی ی ی ی ی ی ی ی د ا ر ی س ا ی ت ک ا ی ن ن ن ن ن ه ه ه ا ی نتایج نیز ب ا ن ت ا ی ج ت ل ی د 35 د ا ر ا ی ب ا ل تا ر ی ن میزان تلید د ا ر د. خ ص ص م ی ز ا ن IFN-γ IL-4 ن ی ز مایع ریی ک ش ت س ل ل م ر د س ن ج ش قرار گرفت ن ت ا ی ج ن ش ا ن د ا د کهمیزان تلید این سایتکاینننننننننننننهااا ا ز ر ز 7 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن آ غ ا ز ر ز 21 ب ه ح د ا ک ث ر م ق د ا ر خ د ر س ی د ه ا س ت. ا ی ن د ا د ه ه ا ب ا ن ت ا ی ج تست تکثیر ل ن ف س ی ت ی ک ه ر ز 21 د ا ر ا ی ب ا ال ت ر ی ن م ی ز ا ن ت ک ث ی ر س ل ل ی ب د ن د ن ی ز م ط ا ب ق ت د ا ر د ک ه خ د ن ش ا ن ا ز ا ر ت ب ا ط ا ف ز ا ی ش م ی ز ا ن ص د ل ن ف س ی ت ه ا ی T B ا ج ر ا ی ی ت ح ر ی ک ا ک س ن ب د ن د ام در ه ف ت ه س م ب ع د م ت ع ا ق ب اا ا ا س ل ل ل ل ه ا ی ا ز PBMCs جدا شده ا ز ه م ا ن د ا م ه ا د ا ر د. ب ا ع ب ا ر ت د ی گ ر پ س ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ب ا ا ف ز ا ی ش م ی ز ا ن ص ص ص ص ص ص ص صص ص ص ص ص ص ص ص ص صصص د ل ن ف س ی ت ه ا ی ا ج ر ا ی ی پ ا س خ ب ه ا ک س ن ق ا ب ل ی ت ت ک ث ی ر

10 10 ن ش ر ی ه م ی ک ر ب ی ل ژ ی د ا م پ ز ش ک ی/ چ ه ا ر د ه م ش م ا ر ه ا ل 1397 پ ی ا پ ی 36 disease virus (FMDV) antigen. Cytokine 72: Delirezh, N., Norian, R., Azadmehr, A. (2016). Changes in some pro-and antiinflammatory cytokines produced by bovine peripheral blood mononuclear cells following foot and mouth disease vaccination. Archives of Razi Institute 71: Diallo, A., and Viljoen, G. J. (2007). Genus capripoxvirus. In Poxviruses, Springer. pp: Eble, P., Bouma, A., Weerdmeester, K., Stegeman, J., and Dekker, A. (2007). Serological and mucosal immune responses after vaccination and infection with FMDV in pigs. Vaccine 25: Eble, P. L., de Bruin, M. G., Bouma, A., van Hemert-Kluitenberg, F., Dekker, A. (2006). Comparison of immune responses after intra-typic heterologous and homologous vaccination against foot-and-mouth disease virus infection in pigs. Vaccine 24: Esther B., Mercedes G. B., Arantza S. P., Paula G., Eliandre D. O., Mari L. V., David A., Victoria L., Francisco S. (2001). Identification of T-cell epitopes in nonstructural proteins of foot-andmouth disease virus. Journal of Virology 75: Gari, G., Abie, G., Gizaw, D., Wubete, A., Kidane, M., Asgedom, H., Bayissa, B., Ayelet, G., Oura, C. A., Roger, F., Tuppurainen, E. S. (2015). Evaluation of the safety, immunogenicity and efficacy of three capripoxvirus vaccine strains against lumpy skin disease virus. Vaccine 33: Heba, A. Khafagy, M. G. A., Abdelmoneim M. M., Mohamed A., Saad, A. A. (2016). Preparation and field evaluationof live attenuated sheep pox vaccine for protection of calves against lumpy skin disease. Benha Veterinary Medical Journal 31: Mohamed, G., Abdelwahab, H. A. K., Abdelmoneim, M. M., Moustafa, Mohamed A., Saad, A. A. (2016). Evaluation of Humoral and Cellmediated Immunity of Lumpy Skin Disease Vaccine Prepared from Local س ل ل ی ت ل ی د سا ی ت کا ی ن آ ن ه ا ن ی ز اف ز ا ی ش ی ا ف ت ه ا س ت. ج م ع ب ن د ی ا ز ن ت ا ی ج ف ق چ ن ی ن ب ر م ی آ ی د ک ه ا ک س ن آ ب ل ه ب ز ی ب ا ا ل ق ا ء پاسخخخخخهای ایمنی ه م ر ا ل س ل ل ی ن اش ی ا ز تحریک سللهای Th1 Th2 ق ا ب ه تلید مقادیررررررر م ن ا س ب ی ا ز آ ن ت ی ب ا د ی ت ل ی د ل ن ف س ی ت ی ه م چ ن ی ن ب ا ا ف ز ا ی ش ه ف ت ه ه ه ا ی قدرت تکثیر IFN-γ IL-4 ب ع د ا ز ا ک س ی ن ا س ی ن ا ز ا ی م ن ی ز ا ی ی م ن ا س ب ی ج ه ت ا س ت ف ا د ه ا ک س ی ن ا س ی ن ا ض ط ر ا ر ی برابرLSD ب ر خ ر د ا ر ا س ت ب ه ر ا ح ت ی م ی ت ا ن ا ز آ ن ب ع ن ا ن ی ک ا ک س ن ه ت ر ل گ پ ی ش گ ی ر ی ک ن ت ر ل ب ی م ا ر ی LSD ا س ت ف ا د ه ن م د. م ن ا ب ع 1. Barman, D., Chatterjee, A., Guha, C., Biswas, U., Sarkar, J., Roy, T. K., Roy, B., Baidya, S. (2010). Estimation of post-vaccination antibody titre against goat pox and determination of protective antibody titre. Small Ruminant Research 93: Blanco, E., McCullough, K., Summerfield, A., Fiorini, J., Andreu, D., Chiva, C., Borras, E., Barnett, P., Sobrino, F. (2000). Interspecies major histocompatibility complex-restricted Th cell epitope on foot-and-mouth disease virus capsid protein VP4. Journal of Virology 74: Coetzer, J. A. W. (2004). Lumpy skin disease; Infectious Diseases of Livestock. Oxford University Press. pp: Danilo, B., Sebastian, D. G., Juan, P., Juan, M. S., Nancy C., Alejandra, V. C., Mariano, P. F., (2015). Foot-and-mouth disease vaccination induces crossreactive IFN-γ responses in cattle that are dependent on the integrity of the 140S particles. Virology 476: Dar, P. A., Hajam, I. A., Suryanarayana, V. S., Kishore, S., Kondabattula, G. (2015). Kinetics of cytokine expression in bovine PBMCs and whole blood after in vitro stimulation with foot-and-mouth

11 11... ی ش ا ن ه د ش ء ا ق ل ا ی ن م ی ا ی ا ه خ س ا پ ت ا ی ص ص خ 22. Zaros, L. G., Bricarello, P. A., Amarante, A. F. T., Coutinho, L. L. (2007). Quantification of bovine cytokine gene expression using real-time RT-PCR methodology. Genetics and Molecular Biology 30: strainin calves and Its Related to Maternal Immunity. Journal of American Science 21: Norian, R., Delirezh, N., and Azadmehr, A. (2015). Evaluation of proliferation and cytokines production by mitogenstimulated bovine peripheral blood mononuclear cells. Veterinary Research Forum 6: OIE (1992). Manual of recommended diagnostic techniques and requirements for biological products. World Organization for Animal Health, Rue de Prony. pp: OIE (2010). Lumpy skin diseas; Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. World Organization for Animal Health, Paris. pp: Reed, L. J., and Muench, H. (1938). A simple method of estimating fifty per cent endpoints. American Journal of Epidemiology 27: Ryan, J. E., Dhiman, N., Ovsyannikova, I. G., Vierkant, R. A., Pankratz, V. S., Poland, G. A. (2009). Response surface methodology to determine optimal cytokine responses in human peripheral blood mononuclear cells after smallpox vaccination. Journal of Immunological Methods 341: Tilahun, Z., Berecha, B., Simenew, K., Reta, D. (2014). Towards Effective Vaccine Production: A Controlled Field Trial on the Immunological Response of Three Lumpy Skin Disease Vaccine Strains in Dairy Farms. Academic Journal of Animal Diseases 3: Tuppurainen, E. S., Pearson, C. R., Bachanek-Bankowska, K., Knowles, N. J., Amareen, S., Frost, L., Henstock, M. R., Lamien, C. E., Diallo, A., Mertens, P. P. (2014). Characterization of sheep pox virus vaccine for cattle against lumpy skin disease virus. Antiviral Research 109: Varshovi, H. R., Keyvanfar, H., Aghaiypour, K., Pourbakhsh, S. A., Shooshtari, A. H., Aghaebrahimian, M. (2009). Capripoxvirus identification by PCR based on P32 gene. Archives of Razi Institute 64:19-25.

12 Journal of Veterinary Microbiology, Volume 14, Issue1, 2018 Characteristic of Immune response induced by live attenuated Gorgan goat pox strain vaccine against lump skin disease in cattle Norian, R. 1, Afzal AhangranN. *2, Varshovi,H.R. 3, Azadmehr, A Ph.D student of Immunology, Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran 2. Assistant professor, Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran 3. Assistant professor, Department of Animal Viral Vaccines, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran 4. Associate professor, Department of Immunology, Babol University of Medical Sciences, Babol, Iran Received Date: 12 July2017 Accepted Date: 1 November2017 Abstract: Lumpy skin disease virus (LSD), Goatpox virus and Sheeppox virus are members of genus Capripoxvirus of the Poxviridae, which have close genetic similarity. Therefore, the use of CaPV-vaccine strains derived from sheep and goat would be useful to protect cattle against LSD. The aim ofthis study was to evaluate the immune responses characteristics of available goat pox vaccine against LSD in cattle. All immunized calves were daily examined for any increase of rectal temperature and appearance of adverse reaction for 5 weeks following vaccination. Humoral immune responses were evaluated by serum neutralization test and cellular immune response were evaluated by MTT, Real-time PCR and ELISA tests. The results showed that thefever and localized swelling at the injection site were observed in vaccinated calves, in comparison to the control group. In assessing of humoral immune response, a significant increase in the neutralizing antibody titer was observed in the vaccinated group in comparison to control group, although this difference in days 35 was higher than the other days (p<0.05). In assessing the cellular immune response, a significant increase was shown for IFN-γ gene expression on day 7 and for IL-4 gene expression on day 21 postvaccination in comparison to day 0 and control group (P<0.05), While the highest cytokine production in cell culture supernatant for IFN-γ and IL-4 was observed at day 21 postvaccination (P<0.05). Also, the lymphocyte proliferation index in vaccinated calves showed a significant increase on day 7, 21, and 35 in comparison to day 0 and control group (P<0.05). According to the results of this study, the results of this study indicated, that goat pox-vaccine due to induction of high level of antibody titer, higher lymphocyte proliferation and IFN-γ and IL-4 production has a good immunogenic response, So It considered suitable vaccine to control of LSD. Keywords: Goat Pox Vaccine, Cellular and Humoral Immunity, Real-time PCR, ELISA, MTT *Corresponding author: Afzal-Ahangran, N. Address: Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran. Tel: n.afzalahangaran@urmia.ac.ir